细胞工程复习.doc细胞工程复习
细胞工程基础
细胞工程是研究生物细胞或组织的学科，通过人为的技术手段，可以调整生物的遗传特性，进而生产出特定的生物制品，满足人类在生产和生活中的需求。
细胞工程的研究内容可分为七大类:
器官、组织和细胞培养
原生质体培养
植物胚胎培养
动物胚胎培养
转基因动植物
胚胎干细胞
染色体工程
实验室组成
动物细胞研究机构包含多个功能区域，具体有洁净工作单元，组织培养空间，细胞特性分析场所，标本准备区域，物品存放地点，以及清洁消毒设施
植物细胞研究机构包含多个功能区域，包括进行无菌处理的专门空间，用于材料准备的工作区域，执行清洁消毒流程的场所，以及设有光线调节的培养区域，还有适合试管植物生长并移栽的玻璃结构建筑
玻璃器皿清洗注意事项
浸泡需要用水泡，首次使用时，要借助5%的稀盐酸进行泡制，用过的，必须马上用清水泡。
清洁时，应选用质地温和的刷子和性能优良的清洁剂，如果需要清洗的物品数量较多，可以采用超声波清洗设备进行清洗，务必将残留物彻底冲洗干净
酸洗，难以用刷子清除的微小残留物，借助清洁剂的强氧化效果，能够被去除掉。常用的清洁剂，由浓硫酸、重铬酸钾和蒸馏水混合调制而成。这种清洁剂具备极强的腐蚀能力，使用时必须将酸慢慢注入水中。
清洗时,要用水彻底清洁,确保没有任何残留物,接着用纯水多次洗涤,最后在烘箱中干燥待用。
物理灭菌方法
湿热灭菌
过滤除菌
干热灭菌
紫外线灭菌
化学灭菌方法:1)熏蒸消毒;2)药剂喷雾消毒
无菌操作室消毒
培养基的成分(植物):
培养基的成分(动物):
生物安全意味着防止动物、植物、微生物等生物体可能对人类健康和自然环境构成威胁的行为,重点在于防范致病微生物或可能带来危险的重组DNA等生物风险。
生物安全实验室分为四级:
植物细胞工程
12、植物细胞全能性的含义:
1)每个植物细胞都具有它母体的全部遗传特性
2)每一个细胞都可以在特定条件下发育成为母体一样的植株。
13、植物细胞具有全能性的原因
一个已经分化的细胞要恢复其全部发育能力通常需要两个步骤，首先是去分化，其次是重新分化
具备极高发育潜力的细胞需要摆脱植物组织环境的束缚，转而置于适宜的体外培养环境中；同时，必须为离体细胞提供必要的诱导因素，诸如适宜的营养物质、植物激素，以及特定的光周期、温度和酸碱度条件
细胞分化，是指从最初发育阶段的合子开始，沿着生物体发育的路径，持续产生形态构造、生理特性各异的细胞、组织及器官，最终构成一个完整植物体的过程，这也就是因为细胞承担不同职责，从而使其构造、功能或生长模式发生转变的现象。
17、分化细胞差异与功能相适应,其含义为:
在发育完全的体细胞里，大约只有百分之五到百分之十的遗传密码会被开启使用。
19、脱分化(去分化)
20、高等植物细胞脱分化和再分化示意图
21、植物愈伤组织
22、分类
23、长期培养物形态发生潜力的丧失(三种学说)
1)生理学说
遗传学说
3)竞争学说
外植体的指向性：一般而言，它指的是在器官、组织乃至细胞层面，于不同的方向上显现出形态构造和生理代谢方面的层次性区别。
25、植物激素对愈伤组织培养的调控作用:
(1)生长素
(2)细胞分裂素
(3)脱落酸
(4)乙烯
器官发生就是植物根茎叶花果实等部位的分化和形成过程。
器官发育存在三个途径，其中第一种是先长出幼芽，随后在幼芽发育的基部生根，最终形成独立的新植株，
第二种是先根后芽
第三种方式是先在愈伤组织各个部分各自长出芽和根，再让两者连接起来变成一株完整植物，这种现象在许多植物里都能见到。
体细胞胚或胚状体指的是离体培养获得的组织,仅适用于体外环境,以此与无融合生殖产生的胚相区分,它源自非合子细胞,不同于由受精卵发育的合子胚,体细胞经历了胚胎发育阶段,具备胚根、胚芽和胚轴的完整构造,且与最初的外植体微管组织没有关联,形成相对独立的单元,这与组织培养中通过器官发生途径形成的不定芽和不定根有所区别。
与器官发生相比,体细胞胚胎发生在组织学上具有明显的特点:
体细胞胚最根本的特征为两极性
体细胞胚的微管系统呈现孤立的“Y”形布局，该布局与外植体组织在构造上互不关联，由此产生了所谓的生殖屏障，这种构造有利于细胞进行分化，并有助于实现全能性分化
由体细胞胚产生的再生植物其遗传特征比较稳定,与通过器官发生方式形成的再生植物相比,两者之间的差异要小得多
28、影响体细胞胚胎发生的因素
1、氮源
2、生长素
3、组织起源
29、P56人工种子示意图
30、控制胚性细胞同步化的方法
1、抑制剂法促进细胞同步分裂
2、低温处理促进细胞同步分裂
3、渗透压控制同步化法
4、同步胚的分段收集筛选法
5、通气法
动物细胞培养技术
动物细胞培养，需要借助无菌手段，将动物体内的组织或器官提取出来，然后复制体内的生理环境，在体外进行培育，通过这种方式，可以观察细胞生长、发育以及衰老等生命活动过程
生物学特征的两重性
基本生物学特征与体内细胞相似
差异性
3、细胞分化;在个体发育中,细胞后代在形态结构和功能上发
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